Ксилозо-лизиновый агар с дезоксихолатом

КсЛД агар — среда для выделения и дифференциации патогенных энтеробактерий, в частности, Shigella и Salmonella.

Согласовано с рекомендациями USP XXIII (1995) и EP ІІ, АРНА (1992).

Принцип действия

Гидролиз ксилозы, лактозы и сахарозы с образованием кислоты сопровождается изменением цвета индикатора фенолового красного до желтого. Образование сероводорода обнаруживается с помощью тиосульфата и солей железа(ІІІ), которое реагирует с образованием черного пигмента колоний, обусловленного сульфидом железа. Бактерии, декарбоксилирующие лизин с образованием кадаверина, могут быть обнаружены по пурпурному окрашиванию вокруг колоний, образовавшемуся вследствие повышения рН. Эти реакции могут протекать одновременно или последовательно, что вызывает появление различных оттенков цвета индикатора или изменяет его цвет от желтого до красного при длительном культивировании. Питательная среда обладает слабыми ингибирующими свойствами.

Состав

  • Дрожжевой экстракт — 3,0 г/л;
  • Хлорид натрия — 5,0 г/л;
  • Лактоза — 7,5 г/л;
  • Д(+)ксилоза — 3,5 г/л;
  • Сахароза — 7,5 г/л;
  • L(+)лизин — 5,0 г/л;
  • Дезоксихолат натрия — 2,5 г/л;
  • Тиосуфатнатрия — 6,8 г/л;
  • Железо(ІІІ)-аммиачный цитрат — 0,8 г/л;
  • Феноловый красный — 0,08 г/л;
  • Агар-агар — 13,5 г/л.

Приготовление

  1. Взвесить 55 г среды.
  2. Внести в колбу 50 мл дистиллированной воды.
  3. Перенести в колбу навеску среды.
  4. Тщательно перемешать, добавить остальные 950 мл дистиллированной воды и полностью растворить навеску. Если остались нерастворенные частицы, продолжить перемешивание.
  5. Подогреть до кипения и полного растворения.
  6. Немедленно охладить среду примерно до 47-50°С в водяной бане, перемешивая для быстрого охлаждения.
  7. Разлить в чашки.
  8. Подсушить чашки и проверить на стерильность перед использованием.

Внимание: следует избегать перегревания, длительной выдержки в водяной бане (47-50°С) при изготовлении больших объемов питательной среды. Среда не подлежит автоклавированию!

рН 7,4±0,2 при 25°С. Среда в чашках прозрачная, красного цвета. Может образоваться кристаллический преципитат солей. Чтобы этого избежать, жидкую среду следует профильтровать через пористый фильтр.

Проведение анализа

Исследуемый материал распределяется тонким слоем на поверхности питательной среды. Инкубация до 48 ч при 35°С, аэробно. Для идентификации колоний необходимы дальнейшие исследования.

Внешний вид колоний Микроорганизмы
Желтые, окруженные желтой зоной, непрозрачные, с зоной преципитации Escherichia coli, Enterobacter, Aeromonas
Желтые, окруженные желтой зоной, непрозрачные, мукоидные, с зоной преципитации Klebsiella
Желтые, окруженные желтой зоной, непрозрачные, иногда с черным центром Citrobacter (лактозоположительные штаммы)
Желтые, окруженные желтой зоной, непрозрачные Serratia, Hafnia
Желтые, окруженные желтой зоной, непрозрачные, иногда с черным центром Proteus vulgaris, Proteus mirabilis (большинство штаммов)
Колонии того же цвета, что и середа, прозрачные, иногда с черным центром Salmonella
Колонии того же цвета, что и середа, прозрачные Shigella, Providencia, Pseudomonas
Оранжевые, слегка мутные Salmonella typhosa (ксилозоположительные штаммы)

Контроль качества среды

Тест-штаммы Инокулюм, КОЕ/мл Обнаружение, % Цвет колоний Черный центр Цвет среды
Escherichia coli ATCC 25922 >105 Не огранич. желтый желтый + преципитат
Enterobacter cloacae ATCC 13047 103−105 ≥30 желтый желтый + преципитат
Klebsiella pneumonia АТСС 13883 103−105 ≥30 желтый желтый + преципитат
Shigella flexneri АТСС 12022 103−105 ≥10 бесцветные  
Shigella sonnei АТСС 11060 103−105 ≥10 бесцветные  
Salmonella typhimurium АТСС 14028 103−105 ≥30 бесцветные +
Salmonella enteritidis NCTC 5188 103−105 ≥30 бесцветные +
Proteus mirabilis АТСС 14273 103−105 ≥30 желтый + желтый/оранжевый
Enterococcus faecalis АТСС 11700 >105 ≤0,01    

Информация для заказа

Каталожный номер Наименование Фасовка
1.05287 XLD Agar, Granulate 500 г.

English pages
© 2004–2017 «Витэк»
Создание сайта — студия «Март»